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人用布氏杆菌病试管凝集试验抗原操作方法

布氏杆菌病试管凝集试验抗原说明书

【主要成分】:本品的主要成分为抗原性良好的灭活布氏杆菌菌体抗原。
【性状】:本抗原为乳白色液体,长时间静置后瓶底可见白色沉淀,震摇后为均匀悬浮液。

【用途】:用于人用体外诊断之布氏杆菌试管凝集试验;仅供科研使用。

【用法与用量】:

1. 稀释液:0.5%苯酚生理盐水。

2. 稀释抗原液:布氏杆菌病试管凝集试验抗原用稀释液1:10稀释使用。

3. 准备五支试验管(以做5个滴度为例),第一试管加入2.3ml生理盐水,其余试管加入0.5ml生理盐水。

4. 0.2ml待检血清加入第一试管2.3ml生理盐水内,混匀后取0.5ml加入第二试管做1:1稀释,第二试管混匀后0.5ml加入第试管做1:1稀释以后各血清稀释管以此类推,第一管内应弃去1.5ml剩余稀释血清,最后一管弃去0.5ml剩余稀释血清只留下0.5ml为试验用

5. 稀释抗原液0.5ml分别加入以上各试验管内,各管内待检血清分别稀释为1:25,1:50,1:100,1:200,1:400

5. 阴阳对照试验管制备将阴阳对照血清按要求体积稀释后操作步骤参照3,4,5

6. 比浊管制备:取稀释抗原液1.25ml加入等量的稀释液作倍比(1:1)稀释,制成稀释抗原液A(1:20), 下表配制比浊管。

管号

稀释抗原液A (ml)

稀释液(ml)

清亮度

标记

1

0.00

1.00

100%

++++

2

0.25

0.75

75%

+++

3

0.50

0.50

50%

++

4

0.75

0.25

25%

+

5

1.00

0.00

0%

-

++++:完全凝集,上层液100%清亮+++几乎完全凝集,上层液75%清亮++显著凝集,液体50%清亮+有微量凝集,液体25%清亮-无凝集,液体不清亮。

7. 孵育:将试验管,对照管及比浊管充分振荡后置37±l温箱孵育20-22h取出室温静置2小时,不   需摇晃,以比浊管为标准判定结果。

8. 结果判定:根据各反应管中上层液体的清亮度判定结果。特别是50%清亮度(++)对判定结果关系较大,一定要与比浊管对比判定。待检血清效价在1:100(++)以上者为阳性;1:50(++)为可疑,以下为阴性。以出现“++”及以上凝集现象的最高血清稀释度判断为该血清的抗体滴度.

【保存与效期】:本品在28保存,有效期2年。

【规格】: 12ml/瓶。

执行标准 布鲁氏菌病诊断标准(WS268-2007)

【注意事项】(1)本品适用于人用体外诊断布鲁氏菌感染的判定,仅供科研使用。
(2)本品出现污染或有摇不散的凝块时,不得使用。
(3)本品用0.5%苯酚生理盐水稀释,稀释后当日用完。
(4)本品使用时需充分摇匀